Le panthéon des ducs d'Osuna fut érigé en 1545 dans le style plateresque, comme le charmant patio qui le précède. Située au-dessous du maître-autel de la collégiale, la chapelle compte trois vaisseaux et un coro avec des voûtes à caissons polychromes noircies par la fumée des cierges. Dans la crypte se trouvent les tombeaux des principaux ducs d'Osuna et des fondateurs de la collégiale.