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Classées chronologiquement, les oeuvres permettent de suivre l'évolution de l'art pictural (essentiellement toscan) jusqu'à la fin du 17^e s. Délaissant les influences byzantines, trois peintres renouvellent la peinture italienne : Cimabue, Duccio et surtout Giotto, tous présents avec des madones. L'inspiration gothique se marque chez le Siennois Simone Martini (Annonciation). Avec la Bataille de San Romano de Paolo Uccello s'ouvre la féconde époque de la Renaissance où géométrisme et volumes traduisent la recherche de la perspective. Même effort chez Masaccio (dont on admirera les fresques à la chapelle Brancacci) et Pierro della Francesca (l'auteur du cycle de la Croix d'Arezzo). Pollaiolo, aux portraits hiératiques, semble marquer un recul. Mais avec Filippo Lippi et ses vierges diaphanes aux drapés travaillés se profile Sandro Boticelli, l'une des gloires du musée, ici représenté par une dizaine d'oeuvres dont le Printemps et Naissance de Vénus. Vient le temps de la seconde Renaissance avec laquelle Leonardo fait la transition : son Annonciation célèbre et son Adoration des Mages ouvrent la voie aux Michel-Ange (la Sainte Famille), Raphaël (Vierge au chardonneret), Andrea del Sarto, Titien et sa Vénus d'Urbino. En chemin, les écoles rhénannes ont été croisées avec Dürer, Altdorfer, Cranach, Holbein sans oublier le tryptique Portinari du brugeois Hugo van der Goes. Quittant la Renaissance, Tintoret, Véronèse, Rubens, Caravage et son Bacchus adolescent achèvent le parcours